如圖3所示，通過相同天麻添加比例，参灰成分不同接菌方式：一組為未發酵組（未接菌），树花一組為發酵組（接菌），固态對比每組總黃酮含量，发酵結果表明灰樹花在生長發酵的对基的影同時能夠分解總黃酮，使得總黃酮含量明顯降低。质主天麻參與灰樹花固態發酵能夠一定程度的活性促進灰樹花分解總黃酮，在天麻添比例分別為10%、天麻20%、参灰成分30%、树花40%、固态50%相比於空白組（0%）分解總黃酮的发酵能力分別提高了1.05、1.24、对基的影1.2、质主1.3和1.01倍。
此結果驗證了灰樹花能夠在以苦蕎為主要基質的培養基進行正常的生長，是由於其能夠對基質中富含的總黃酮類物質進行分解代謝提供自身的生長需求。同時也驗證了添加一定比例的天麻參與灰樹花發酵能夠一定程度的促進其分解代謝總黃酮的能力。通過提高總黃酮類物質的分解能力，提高大分子黃酮類物質轉化為小分子黃酮苷類物質，並且增加其水溶性和分子利用程度，進而提高菌質食藥用價值。
2.3 不同天麻添加量對灰樹花發酵基質蘆丁及異槲皮苷含量的影響
由圖3和圖4研究結果可知，以苦蕎為主要發酵基質，灰樹花會對總黃酮類物質進行分解。為進一步探究對灰樹花發酵基質中總黃酮類物質中具體成分含量的影響，采用HPLC對基質中蘆丁和異槲皮苷進行含量檢測，結果表明在發酵12 d後，發酵基質中蘆丁和異槲皮苷的含量均有不同程度的降低。
如圖5可知，隨著天麻添加量的增加，發酵基質中蘆丁的含量減少程度更高，相比於空白組（未添加天麻）在天麻添加比例為10%、20%、30%、40%和50%時，蘆丁含量降低量分別增加了1.37、1.70、1.03、1.13和4.0倍（P<0.01）。
與空白組相比均具有極顯著性差異，說明在天麻添加比例為50%時，對灰樹花分解蘆丁具有最大的促進作用；如圖6可知，在天麻添加比例為分別為20%、30%、40%和50%時，對灰樹花分解異槲皮苷具有極顯著地促進作用，相比於空白組（未添加天麻），對異槲皮苷的降低量分別提高了1.06、1.09、1.08和1.08倍（P<0.01）。文獻記載，橙皮苷酶可以將蘆丁有效地轉化為異槲皮苷，在此次實驗中，分別對同一基質中的蘆丁和異槲皮苷物質進行含量測定，異槲皮苷的含量並未升高，可以排除蘆丁含量的減少是由於灰樹花分泌的橙皮苷酶將其轉化為異槲皮苷，而是灰樹花在生長過程中對蘆丁進行了分解利用。
2.4 灰樹花對不同添加比例天麻主要成分的影響
微生物在生長代謝的同時會向外界分泌多種胞外酶：如纖維素酶、蛋白酶、澱粉酶等，分泌的胞外酶會按照各種酶的專一性選擇性地分解代謝有機物轉化為小分子。灰樹花分泌的胞外酶同樣可以作用於天麻的成分，選擇天麻所含的四種主要成分（天麻素、對羥基苯甲醇、對羥基苯甲醛、巴利森苷）進行HPLC檢測，探究灰樹花對天麻四種成分的影響。結果表明，在天麻添加量為10%~50%時，與未接種灰樹花（未發酵組）相比，接種灰樹花（發酵組）能夠幾乎完全分解天麻素。
由表1可知，在天麻添加比例為10%，灰樹花對對羥基苯甲醇及對羥基苯甲醛的分解最為顯著，表明高比例的天麻參與灰樹花固態發酵能夠抑製灰樹花對天麻本身對羥基苯甲醇和對羥基苯甲醛的分解；在天麻添加量分別為5個添加比例時，都能夠提高巴利森苷的含量，其中50%天麻添加量是提高其含量最為顯著。表明在天麻參與灰樹花固態發酵時，整個發酵體係存在著巴利森苷成分不同程度的生物轉化。文獻表明在微生物參與穀物進行發酵時，能夠改變整個發酵體係的生物活性的種類和含量進而提高發酵物的食藥用價值。
3 結論
以貴州特色藥食同源作物苦蕎、薏仁米等為主要基質，接種灰樹花作為發酵菌種，灰樹花在此基質上能夠正常的生產代謝，灰樹花能夠有效分解利用苦蕎及薏仁米等基質，試研發創新一種新的適合灰樹花菌絲體生長的培養基質。
以不同比例的中藥天麻參與灰樹花的固態發酵，研究天麻對發酵基質中主要活性成分含量的影響。結果表明：不同比例的天麻參與固態發酵，對灰樹花的菌絲體的生長沒有明顯的抑製作用，同時天麻的加入能夠不同程度地促進灰樹花對基質中總黃酮物質的分解，通過提高總黃酮類物質的分解能力，提高大分子黃酮類物質轉化為小分子黃酮苷類物質，並且增加其水溶性和分子利用程度，進而提高菌質食藥用價值，並且灰樹花也能夠對天麻所含主要成分天麻素、對羥基苯甲醇、對羥基苯甲醛等物質進行分解，與未發酵組相比都存在不同程度的分解，後期的研究重點主要研究總黃酮類和3種主要天麻活性成分的具體轉化物質。
發酵體係中巴利森苷的含量與未發酵組相比反而含量有所提高，表明通過灰樹花的發酵，可以進行巴利森苷成分的生物合成和富集。試驗驗證了灰樹花在非傳統基質上仍然能夠進行正常的生長，並且能夠分解總黃酮類物質和改變基質的表觀和內部結構，天麻參與其發酵能夠促進其分解總黃酮類物質。拓展了中藥資源與大型真菌共發酵的思路和前景，為創新藥物菌質的品種提供了一種新的思路。
聲明：本文所用圖片、文字來源《食品與發酵工業》，版權歸原作者所有。如涉及作品內容、版權等問題，請與本網聯係刪除
相關鏈接：纖維素酶，天麻，黃酮
