5、真菌最陡爬坡實驗

選擇合適的色素步長，對X₂、分离X₂、表征X₆，及培3個顯著因素進行最陡爬坡實驗，养基优化結果如表3所示，真菌隨X₂，色素X₂，分离X₆含量的表征增加，發酵液中色素吸光度值(Y)先升高後降低，及培在第3組達到最高，养基优化因此以第3組濃度作為響應麵實驗的真菌中心點。

6、色素響應麵實驗設計及結果

根據最陡爬坡實驗結果，分离對X₂，X₂，X₆進行響應麵設計，各因素水平如表4所示，響應麵試驗設計及結果如表5所示。對實驗結果進行數學方程擬合，得到色素吸光值(Y)與3個顯著性因素的二次回歸模型：

吸光值=1.0037+0.0204X₂+0.0489X₄+0.0442X₆-0.1100X₂X₂-0.0925X₄X₄-0.1522X₆X₆-0.0132X₂X₄+0.0595X₂X₆+0.0640X₄X₆

有回歸模型的方差分析(表6)可知：F=8.08、P=0.017(P＜0.05)表示回歸模型顯著，決定係數R²=0.9357(R²＞0.85)，失擬項P=0.052(P＞0.05)表示失擬項不顯著、回歸模型擬合度良好。由表7可知X₂X₂，X₄X₄的P值小於0.05，表明NaN0₃、MgS0₄·7H₂0的二次項對模型具有顯著影響，X₆X₆的P值小於0.01，表明CS的二次項對模型具有極顯著影響，而一次項和交互項的顯著性較差，也驗證了各因素與響應值之間不是線性關係。

利用Minitabl7得到該模型X₂、X₄、X₆的極值分別為0.1313、0.3333、0.2323，結合最陡爬坡實驗設計的原理得到X₂、X₄、X₆的真實值分別為0.6803、0.0366、14.4646，實際操作中可取X₂=0.68、X₄=0.037、X₆=14.5，故優化後的發酵培養基的配方為：NaNO₃ 0.68g/L，K₂HPO₄ 0.48g/L，MgSO₄·7H₂O 0.037g/L，CaCl₂·2H₂O 0.036g/L，葡萄糖18g/L，CS14.5mL/L，TM1mL/L。經過重複性實驗得到優化後培養基中色素吸光度值為1.004，是優化前0.612的1.64倍。

三、結論

（1）真菌DT06產生的黃色色素是一種新色素，為多羥基化合物。

（2）DT06色素有良好的抗氧化性和穩定性，具有潛在應用價值。

（3）培養基優化後DT06色素的產量是優化前的1.64倍。

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